L’HPLC (High Performance Liquid Chromatography) è uno strumento analitico derivato dalla cromatografia classica e si basa sugli stessi principi.

Nella cromatografia classica il componente principale è la colonna che contiene la fase stazionaria all’interno della quale scorre la fase mobile rappresentata dall’eluente.

Il passaggio dell’eluente avviene tramite la spinta esercitata dalla colonna di liquido costituente la fase mobile e quindi il processo, se la fase stazionaria non è abbastanza porosa, può essere anche molto lento. La separazione dei componenti avviene tramite interazioni che si creano fra i costituenti della miscela e le due fasi. Le interazioni possono essere di tipo elettrostatico, dipolo-dipolo, forze di Van Der Waals oppure tramite un meccanismo di scambio ionico. Questo dipende dalle proprietà sia delle due fasi sia della miscela da separare.

Nell’HPLC la forza che permette all’eluente di scorrere nella colonna, è rappresentata dalla pressione che è applicata da una pompa in testa alla colonna e forza la fase mobile a scorrere all’interno della fase stazionaria. Questo permette non solo di rendere il processo più rapido ma permette anche di ottenere un maggior numero di piatti teorici il che vuol dire una migliore risoluzione.
A differenza della gascromatografia, che utilizza la temperatura come discriminante per la separazione delle varie sostanze, l' HPLC utilizza invece le alte pressioni; Si presta molto bene per l' analisi delle sostanze termolabili, cioè non vaporizzabili e che si altererebbero con le alte temperature.


PRESENTAZIONE STRUMENTO:



Video
in questo video, è possibile vedere una semplice applicazione fatta con l'HPLC esattamente viene analizzata la caffeina.





Video (cromatograma per la HPLC)
In questo video, viene descritto un cromatogramma ottenuto con un HPLC





DESCRIZIONE DELLA TECNICA ANALITICA DELL'HPLC MANUALE SULL'USO DEL SW CROMONAV PER HPLC





CRUCIVERBA SULL' HPLC






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Autori: Ferro-Galante